Product Information

產品簡介

PI，即碘化丙啶，是一種溴化乙啶的類似物，能夠與DNA強力結合，它在嵌入雙鏈DNA後釋放紅色熒光，實現對DNA或細胞核的染色。PI不能穿透完整細胞膜，但能穿透雕亡晚期細胞及死細胞的破損細胞膜，利用該特點，PI通常與Calcein-AM或FDA等熒光探針聯合使用，進行活死細胞染色及觀察，或采用流式細胞儀相對定量檢測細胞雕亡（apoptosis）及細胞周期。PI-雙鏈DNA覆合物的最大激發波長為535nm，最大發射波長為615nm。

本產品PI染色液為即用型，PI濃度為100 μg/mL，可直接用於壞死細胞或組織的細胞核染色，以及細胞懸液用此染液染色後可以用於流式細胞儀檢測細胞周期。

商品內容物:

實驗步驟:


l 流式細胞儀檢測細胞周期操作步驟：

1. 培養好的活細胞經消化、PBS洗滌、低速離心收集得到細胞團塊。

2. 緩慢加入1-3 mL -20℃預冷的90%乙醇，回溶細胞，O/N。

3. 1500轉離心5min收集細胞，以PBS回溶，再次離心，去除上清液。

4. 加入250 μL PBS回溶細胞。

5. 加入2 μL濃度為1 mg/mL的RNase A（推薦G3405），37℃水浴40 min。

6. 加入50 µL PI染液，避光孵育20 min（時間可根據實驗材料的染色結果調整）。

7. 流式細胞儀檢測。

 II 熒光顯微鏡觀察活死細胞操作步驟：

1. 培養好的貼壁細胞，去除培養基，用PBS清洗2次。

2. 將PI染液用PBS稀釋10-20倍，配制成至終濃度為5-10 μg/mL的PI染色工作液。向孔板內加入適量PI染色工作液覆蓋細胞，室溫避光孵育5-10 min。

3. 棄去染色工作，加入PBS覆蓋細胞，熒光顯微鏡觀察。死細胞或雕亡晚期細胞的核呈紅色熒光。