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Servicebio 蛋白銀染試劑盒
商品編號：G2080-25T
銀染是靈敏度較高的一種染色方法，其基本原理是通過被還原陰離子在蛋白質上形成黑色沈澱來顯示蛋白條帶。銀染的靈敏度比傳統的考馬斯亮藍染色法高100倍，可檢測低於0.5 ng的蛋白質。正是由於其較高的靈敏度，銀染廣泛應用於2D凝膠分析及極低蛋白含量測定的垂直PAGE凝膠中，是對凝膠中低豐度蛋白檢測的常用方法。本產品可用於SDS-PAGE或PAGE聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質檢測，靈敏度高，操作方便快捷，背景幾乎無色，可在90 min內完成1塊凝膠的銀染。本試劑盒可以染25塊同規格的凝膠。
實驗步驟
1. 固定：按下表配制固定液。將凝膠置於潔凈的染缸中，超純水清洗三次，加入固定液20 mL覆蓋凝膠，水平搖床慢搖（60-70 rpm）孵育30 min，為防止醋酸和乙醇揮發，請使用保鮮膜將染缸密封。延長固定時間可進一步降低背景。
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固定液配置 |
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Component |
Volume（20 mL） |
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Ultrapure Water |
10 mL |
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Absolute Alcohol |
8 mL |
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Glacial Acetic Acid |
2 mL |
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Silver Stain Enhancer |
40 μL |
2. 洗滌：倒掉固定液，更換超純水覆蓋凝膠，水平搖床快震盪洗三次，每次10 min。
3. 增敏：按下表配制敏化工作液。加入敏化工作液覆蓋凝膠，水平震盪慢搖孵育1 min。
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敏化工作液配置 |
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Component |
Volume |
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Ultrapure Water |
18 mL |
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10×Silver Stain Sensitizer |
2 mL |
4. 洗滌：倒掉敏化工作液，更換超純水，搖床快搖清洗三次，每次20 s。
5. 銀染：按照下表配制銀染工作液。加入銀染工作液覆蓋凝膠，搖床慢搖孵育20 min；銀染工作液需現配現用，盡量在2 h內使用。
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銀染工作液配置 |
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Component |
Volume |
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Ultrapure Water |
18 mL |
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10×Silver Stain |
2 mL |
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Silver Stain Enhancer |
16 μL |
產品庫存：0
