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Servicebio SweMagrose COOH (羧基磁珠)
商品編號：G3652
磁分選技術可以便捷的分選或富集抗體、抗原、凝聚素、蛋白酶、核酸和細胞，同時保持其生物活性；瓊脂糖羧基磁珠（SweMagrose COOH）采用高分子聚合技術將超順磁性材料和高分子材料完美融合在一起，最終制成一種超順磁性氧化鐵微球的懸浮液，表面包被羧基；相較於傳統磁珠，SweMagrose COOH具有更快的磁響應性、良好的分散性、極低的非特異性吸附和更豐富的結合位點；SweMagrose COOH可以在特殊試劑（如EDC）的作用下高效地與多種生物配體（寡核苷酸、多肽、蛋白、藥物分子等）進行高載量結合，是進行包被、吸附、化學改性等後續處理的良好基礎材料。
結合位點豐富：加強與配體的特異性結合；
高磁響應性：磁響應更快，節省實驗時間；
超順磁性：外界磁場消失後依舊能保持良好的分散性；
優異的分散性和重懸性：良好的分散性和重懸性保證了實驗的穩定性，操作更為便捷；
物理化學穩定性優良：實驗重覆性效果更有保障。
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Component |
SweMagrose COOH |
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Bead Diameter |
30~150 μm |
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Surface amino content |
60μmol/mL gel |
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Preservation solution |
20% ethanol solution |
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Magnetic core |
Fe3O4 |
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Shell layer |
Agarose |
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Magnetization |
Superparamagnetism |
實驗步驟
（以偶聯蛋白G為例）
A. 自配試劑準備：
MEST溶液：MES(2-嗎啉乙磺酸) 100 mM,0.05% Tween 20，氫氧化鈉調pH 5.0；
EDC（碳二亞胺）溶液：EDC 10 mg/mL溶解於MEST溶液；
NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）溶液：NHS 10 mg/mL溶解於MEST溶液；
B. 磁珠表面羧基活化：
1. 混勻瓊脂糖羧基磁珠（SweMagrose COOH）後，取100 µL到1.5 mL EP管中，置於磁分離架上磁吸分離30 s，去除上清液，用200 µL MEST溶液進行磁吸分離洗滌2次，然後吸除上清液；
2. 迅速加入新鮮配制的100 µL EDC溶液和100 µL NHS溶液到裝有磁珠的離心管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，25℃活化30 min，該期間請保持磁珠的懸浮狀態（可利用垂直混合儀進行顛倒混勻）；經過上述步驟之後，磁珠表面的羧基已經活化，可以與帶有伯氨基的生物配體進行共價偶聯（活化狀態不宜長時間保存，建議立即進行偶聯）；
C. 磁珠與生物配體的共價偶聯：
1. 磁吸分離吸除上清液，加入50~200 µg生物配體（用量、濃度及緩沖液類型需要根據具體實驗進行優化，配體緩沖液可參考如下幾種：100 mM 2-嗎啉乙磺酸緩沖液，pH 4.8；200 mM碳酸氫鈉緩沖液，pH 8.3；50 mM硼酸鹽緩沖液，pH8.5；100 mM磷酸鹽緩沖液；100 mM氯化鈉溶液，pH 7.4等；緩沖液中可加入0.05% Tween 20以提高磁珠分散性，避免緩沖體系中存在除生物配體以外含有伯氨基的試劑），輕柔地混勻；
2. 25℃偶聯2 h或25℃偶聯1 h後放置4℃靜置過夜，偶聯期間保持磁珠的懸浮狀態（可利用垂直混合儀進行顛倒混勻）；
3. 離心管置於磁分離架上磁吸分離吸除上清液，加入200 µL PBST溶液（pH 7.2，且含1% BSA）重懸磁珠（可根據需要進行超聲），25℃反應1 h封閉磁珠表面未反應的活化羧基基團，該期間保持磁珠的懸浮狀態（可利用垂直混合儀進行顛倒混勻）;
4. 離心管置於磁分離架上磁吸分離吸除上清液，每次用200 µL PBS溶液（pH 7.2）或保存溶液洗滌3次後，重新懸浮於保存溶液中（可根據需要來確定保存溶液的加入量，以調整偶聯配體磁珠的濃度），保存於4℃；如果固定的生物配體穩定，可以在保存溶液中加入0.02%（w/v）疊氮化鈉（NaN3）作為抑菌劑。
注意事項
1. 冷凍、乾燥和離心等操作會引起磁珠團聚，不易於重懸和分散，並且影響磁珠表面功能基團的化學活性。
2. 本產品保存在20%乙醇中，使用前用純水或緩沖液洗滌磁珠2-3次，以去除保存液中的乙醇。
3. 使用本產品前請務必充分振蕩或超聲使磁珠呈均勻的懸浮狀態。
4. 使用時需選擇配套的磁分離架。
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