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Servicebio SweMagrose NH2 (氨基磁珠)
商品編號：G3658-1ML
磁分選技術可以便捷的分選或富集抗體、抗原、凝聚素、蛋白酶、核酸和細胞，同時保持其生物活性；瓊脂糖氨基磁珠（SweMagrose NH2）采用高分子聚合技術將超順磁性材料和高分子材料完美融合在一起，最終制成一種超順磁性氧化鐵微球的懸浮液，表面包被羧基；相較於傳統磁珠，SweMagrose NH2具有更快的磁響應性、良好的分散性、極低的非特異性吸附和更豐富的結合位點；SweMagrose NH2可以在特殊試劑（如戊二醛）的作用下高效地與多種生物配體（寡核苷酸、多肽、蛋白、藥物分子等）進行高載量結合，是進行包被、吸附、化學改性等後續處理的良好基礎材料。
結合位點豐富：加強與配體的特異性結合；
高磁響應性：磁響應更快，節省實驗時間；
超順磁性：外界磁場消失後依舊能保持良好的分散性；
優異的分散性和重懸性：良好的分散性和重懸性保證了實驗的穩定性，操作更為便捷；
物理化學穩定性優良：實驗重覆性效果更有保障。
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Component |
SweMagrose NH2 |
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Bead Diameter |
30~150 μm |
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Surface amino content |
60 μmol/mL gel |
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Preservation solution |
20% ethanol solution |
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Magnetic core |
Fe3O4 |
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Shell layer |
Agarose |
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Magnetization |
Superparamagnetism |
實驗步驟
(以偶聯蛋白G為例)
1. 自配試劑準備：
PBS溶液（pH 7.4）:2.7 mM KCl，2.0 mM KH2PO4，137 mM NaCl，10 mM Na2HPO4，pH 7.3-7.5@25℃(推薦G4202-100ML)；
0.1 M碳酸鹽緩沖液（pH 9.6）：分別配制0.1 M碳酸鈉和0.1 M碳酸氫鈉溶液，用0.1 M碳酸氫鈉溶液調節0.1 M碳酸銨溶液的pH到9.6；
戊二醛溶液：25%戊二醛水溶液45 μL加入到55 mL 0.1 M碳酸鹽緩沖液（pH 9.6）中混勻；
2. 磁珠預處理：混勻瓊脂糖氨基磁珠(SweMagrose NH2)後，取100 μL到1.5 mL EP管中，置於磁分離架上磁吸分離30 s，用500 μL PBS溶液（50 mM PBS，pH 7.4)洗3次，磁吸分離吸除上清；
3. 戊二醛活化：加入新鮮配制的100 μL戊二醛溶液（25%戊二醛45 μL+55 mL pH=9.6 0.1 M碳酸鹽緩沖液）到EP管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，用錫箔紙包裹後25°C活化1h（反應避光，以避免戊二醛自身發生聚合），該期間請保持磁珠的懸浮狀態（可利用垂直混勻儀進行顛倒混勻）；
4. 活化後洗滌：磁珠活化後，磁吸去上清，使用PBS緩沖液清洗3次；
5. 磁珠偶聯：向裝有磁珠的EP管中加入50~200 μg蛋白（濃度及用量需根據實驗具體情況進行優化，這裏推薦使用0.1 M碳酸鹽緩沖液（pH 9.6）並加入0.05% Tween-20提高分散性），輕柔混勻，用錫箔紙包裹後25°C反應3h（反應註意避光），或者25°C反應 1 h後4℃偶聯過夜，偶聯期間保持磁珠懸浮狀態；
6. 偶聯後封閉：將EP管置於磁分離架上去除上清，加入500 μL封閉液（可以使用5%（w/v） BSA溶解於PBS溶液中，如100 mL PBS溶液中溶解5 g BSA）,25°C反應1h，期間保持磁珠懸浮狀態；
7. 保存：磁吸去上清，用200 mL PBS或保存液清洗三次後，根據實際需要控制磁珠濃度，保存於4℃，必要時可加入0.02%（w/v）疊氮化鈉。
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