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Servicebio RNA Marker 1000由體外轉錄得到的7條高純度單鏈RNA組成,其長度分別為100、200、300、400、600、800、1000 Bases,每微升產品中RNA量約為700 ng,適用於RNA的常規凝膠電泳。
儲存與運輸
乾冰(dry ice)運輸;-80℃保存,有效期12個月(-20℃短期保存)。
實驗步驟
1. 取1-2 μL RNA Marker 1000與2×RNA Loading Buffer按等體積比例混合,置於70℃孵育10 min後,立即冰浴2 min,加入0.5 μL EB(0.5 mg/mL)(或0.5 μL G3606 SerRed)即可進行電泳檢測;
2. 推薦RNA甲醛瓊脂糖變性凝膠中瓊脂糖濃度為3%,甲醛濃度為18%(v : v),電泳液為1×MOPS Buffer。凝膠制備具體方法(50 mL):稱取1.5 g瓊脂糖加入36 mL RNase-free Water中(使用潔凈的無酶水潤洗過的錐形瓶),加熱融化後,加入5 mL 10×MOPS Buffer,待溶液冷卻至不燙手時,加入9 mL甲醛(37%),輕柔混勻(透光觀察無油狀物)後倒膠,室溫凝膠30 min。
3. 建議低溫電泳檢測:將潔凈的電泳槽置於冰水中低溫電泳,倒入適量預冷的1×MOPS Buffer(沒過膠),5-10 V/cm(恒壓)電泳至合適位置,凝膠成像系統觀察。(註:除了在樣品中加染料電泳方式外,也可以采用電泳後凝膠浸染方式,但不易浸染太長時間)
注意事項
1. 實驗時請帶好實驗手套、口罩,實驗中所用耗材需無菌無酶,防止RNase汙染導致RNA降解。
2. 若需得到更高質量電泳結果,可適當減小制膠厚度,能滿足上樣量需求即可;RNA marker電泳過程中建議每隔10 min晃動下電泳槽。
3. RNA marker條帶為單鏈線性RNA,適用於單鏈線性RNA樣品的分子量參照,對於Total RNA,本產品只能作為定性參照。
4. 為了避免RNA Marker反覆凍融降解,建議進行合理分裝使用。
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