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Servicebio ATP Assay Kit（ChemiLuminescence）
商品編號：G4309-48T
ATP是細胞內重要的能量分子，在細胞的各類生理生化活動中起著重要的作用，被稱為生物體內能量貨幣。本試劑盒運用螢光素酶在ATP提供能量的情況下，催化螢光素產生化學發光反應，且在一定範圍內，發光強度與ATP含量成正比的原理，可對樣品間ATP進行有效檢測。
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ComponentNumber |
Component |
G4309-48T |
G4309-96T |
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G4309-1 |
Lysis Buffer |
50 mL |
100 mL |
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G4309-2 |
ATP Detecting Enzyme Reagent |
100 μL |
200 μL |
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G4309-3 |
ATP Assay Buffer |
5 mL |
10 mL |
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G4309-4 |
ATP standard (200 μM) |
100 μL |
200 μL |
實驗步驟:
1. 樣品準備：
1.1. 組織樣品：添加裂解液到組織（1：9比例，即0.1 g：0.9 mL）中進行勻漿裂解；勻漿5-10 min左右，並煮沸2 min；流水冷卻後，4℃，10000 g離心10-15 min，取上清置於冰上待用；
1.2. 細胞樣品：細胞收集後，使用裂解液重懸細胞（約每2×106個細胞加200-300 μL）勻漿5 min左右，並煮沸2 min；流水冷卻後，4℃，10000 g離心10-15 min，取上清置於冰上待用；
2. 檢測準備工作：
2.1. ATP檢測標準品配制：根據需要，使用超純水將ATP標準品（200 μM）進行梯度稀釋（例如稀釋至4/2/1/0.5/0.25/0.125 μM），與待測樣品進行後續檢測後，用於標準曲線法數據分析；
2.2. ATP檢測工作液配制：將ATP檢測酶試劑和ATP檢測緩沖液按1：50配制成ATP檢測工作液（根據實際組數配制，現配現用）
3. ATP檢測：
參考下表進行ATP檢測：
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Standard tube |
Blank tube |
Sample tube |
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ATP assay working solution |
100 μL |
100 μL |
100 μL |
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Let stand at room temperature for 5 min |
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ATP standards |
20 μL |
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Ultrapure water |
20 μL |
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Samples to be tested |
20 μL |
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Rapid detection using an instrument such as an enzyme marker - shake the plate for 15 s or blow it up with a pipette gun to detect fluorescence values |
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注意：為了實驗數據的準確性，盡量避免添加不同樣品間的時間過長。
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