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Servicebio 慢病毒快篩試劑 (Rapid Lentivirus Titration Cassette )
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本產品是基於膠體金側向層析技術的HIV-1 P24蛋白半定量檢測卡,可以用於相關慢病毒載體和假病毒包裝效率的快速評估(P24蛋白是慢病毒外殼中含量最大的標志性蛋白)。本產品是采用膠體金免疫層析技術快速檢測分泌到慢病毒包裝上清中的遊離囊蛋白P24,以此作為一個靈敏的、間接的替代指標來顯示病毒產量的檢測卡,通過對囊蛋白P24的檢測,能快速確定包裝液中的慢病毒滴度是否已經達到收獲需要。本產品僅需要8~12min即可得到檢測結果,與傳統轉染方法需要花費2~3天相比,具有明顯優勢。
P24蛋白濃度與慢病毒滴度關系:
P24 concentration |
500 ng/mL |
100 ng/mL |
50 ng/mL |
10 ng/mL |
1 ng/mL |
LPs/mL |
6.25×109 |
1.25×109 |
6.25×108 |
1.25×108 |
1.25×107 |
TU/mL |
6.25×106-7 |
1.25×106-7 |
6.25×105-6 |
6.25×105-6 |
6.25×104-5 |
提示:一個慢病毒顆粒(Lentiviral Particle, LP)中約有2000個P24蛋白分子,正常情況下,每100-1000 LPs中會有1個具有感染活性的病毒載體,即1 TU(Transducing Unit);病毒滴度至少在1×106TU/mL以上才對某些種類細胞具一定的轉染效力。(一般能濃縮150倍左右)。
慢病毒滴度快速檢測卡(膠體金法)10 min檢測效果圖:
將P24蛋白稀釋成500 ng/mL、100 ng/mL、50 ng/mL、10 ng/mL、1 ng/mL、0,然後各取80 µL的稀釋液滴加到加樣孔中,平放在實驗桌上,靜置8-12 min,觀察結果。
Component Number |
Component |
G1804-10T |
G1804-10T |
Rapid Lentivirus Titration Cassette (colloidal gold) |
10 T |
Manual |
1 pc |
1、打開包裝取出檢測卡,平放在實驗台上;
2、用微量移液器吸取來自來自包裝慢病毒的細胞(比如293細胞)培養上清液80~100 µL,滴加到加樣孔中;
3、靜置8~12 min讀取結果,15 min後判讀結果無效。
結果判斷
1、在可視窗口中,質控線(C)和檢測線(T)均顯色即為陽性;
2、質控線(C)顯色,檢測線(T)不顯色,檢測結果為陰性;
3、質控線(C)不顯色,無論檢測線(T)是否顯色,檢測無效;
4、根據P24含量的多少,(T)線顏色有所不同,含量越高,顏色越深;含量越低,顏色越淺。
注意事項
1、如果組織培養基的顏色導致背景高,可以使用PBS或者培養基稀釋樣品再進行層析。
2、該檢測試劑卡不建議凍存。
3、請開封後盡快使用。
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