產品簡介

Servicebio Sumo-tag 快篩試劑是基於膠體金側向層析原理，采用夾心法原理快速檢測細胞培養上清、細胞/細菌裂解產物或蛋白純化後的Sumo標簽蛋白的含量，是一種半定量的Sumo標簽蛋白檢測卡。

本產品主要結構由樣品墊、結合墊、層析膜、吸水紙、背板等結構組成。在層析膜上固定有羊抗鼠IgG多克隆抗體（質控線C）和抗Sumo蛋白抗體1（檢測線T）；在結合墊上固定有膠體金標記的抗Sumo蛋白另一抗體2。當待測樣品滴加到樣品墊時，通過毛細作用，液體向吸水紙方向移動。如果被檢樣本中含Sumo標簽蛋白時，則首先與結合墊上的金標抗Sumo標簽抗體1結合，結合繼續向上層析與固定在檢測線T處的抗體2結合形成“金-抗體1-蛋白-抗體2”覆合物，從而在檢測線T出現一條紅色條帶，同時質控線C也顯色；反之樣本中不含Sumo標簽蛋白則檢測線T不顯色，質控線C顯色。質控線C所呈現的紅色條帶是判斷層析過程是否正常的標準。

操作步驟

1. 打開包裝取出檢測卡，平放在實驗台上；

2. 用微量移液器吸取80-100 µL培養上清、細胞/細菌裂解產物或蛋白純化後樣品，滴加到加樣孔中；

3. 靜置10~15 min讀取結果，20 min後判讀結果無效。


結果判斷

1. 陽性結果：在可視窗口中，質控線C和檢測線T均顯色；

2. 陰性結果：僅質控線C顯色；

3. 無效結果：質控線C不顯色，無論檢測線T是否顯色，此時需重新檢測；

註：當 Sumo-tag蛋白在0.01 μg/mL-1 μg/mL時，檢測線T的顯色強度與檢測樣品中Sumo-tag標簽蛋白含量正相關。


效果展示

取出檢測卡，平放在實驗桌上，將帶Sumo標簽蛋白用PBS分別稀釋成1 μg/mL、100 ng/mL、10 ng/mL、1 ng/mL，然後各取100 μL的稀釋液滴加到加樣孔中，靜置10 min，觀察結果。

                                                                                      

                                                                       
                                                                       Sumo-tag快速檢測卡（膠體金法）10 min的效果圖

靈敏度

最低可檢測濃度為1 ng/mL，當樣品中Sumo-tag蛋白含量低於1 ng/mL時，肉眼不易區分。


注意事項

1. 如果樣品的顏色導致背景高，可以使用PBS或者培養基稀釋樣品再進行層析。

2. 測試前，冷藏的樣本須恢覆至室溫，冷凍的樣本須完全融化、混勻，恢覆至室溫後再檢測，如果樣品出現明顯渾濁，請離心後取上清檢測。

3. 為了結果的準確性，客戶需設立陰性對照，建議對照樣品與待測樣品為同基質。

4. 該檢測試劑卡不建議凍存。

5. 開封後盡快使用。