產品介紹

Proteinase K（蛋白酶K）是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K應用廣泛，常見於分子生物學、細胞生物學、免疫組化等相關實驗中用於消化各種蛋白，例如制備脈沖電泳的染色體DNA、去除DNA和RNA制備中的核酸酶、蛋白質印跡、組織細胞通透等實驗。常用濃度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、鹽酸胍對Proteinase K的活力影響不大，而變性劑如SDS（1%）可提高其活性，Proteinase K常用工作濃度為50-100 µg/mL，根據所用緩沖液中是否含有SDS、尿素以及pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。

本產品Recombinant Proteinase K為白色至類白色凍幹粉，利用來源於Tritirachium album Limber（林伯氏白色念球菌）的絲氨酸蛋白酶基因，經定點突變改造並通過畢赤酵母菌株重組表達、純化、凍幹，不含DNase、RNase，分子量約30 kDa，經SDS-PAGE檢測純度≥95%。重組表達的突變體Proteinase K比野生型酶性能更優，其在寬廣的pH和溫度範圍都能保持酶活性，有效的pH範圍為pH 7.0-11，最佳pH為pH 10左右；有效的溫度範圍為30-65℃，最佳反應溫度為55℃，在50℃-60℃可以保持90%的酶活性，65℃仍然能夠保持85%左右的酶活性。

在37℃、pH 7.5條件下，以酪蛋白為底物，1分鐘水解釋放1 μmol酪氨酸所需酶量定義為一個酶活性單位。本司生產的Recombinant Proteinase K比活力（Specific activity）≥30 U/mg。

使用說明

Proteinase K凍幹粉覆溶：稱取適量凍幹粉，推薦使用含20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 50% Glycerol, 5 mM CaCl2, pH 7.5的緩沖液完全溶解後儲存於-20℃，可保存至少6個月。


注意事項

1. 由於該Proteinase K酶活性高、穩定性好，應註意避免實驗交叉汙染。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。