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Servicebio Recombinant DNase I (RNase-free)
商品編號：G3342-500U
DNase I是一種內切DNA酶，可以將單鏈、雙鏈DNA降解為5’磷酸基團、3’羥基末端的單脫氧核苷酸或者寡核苷酸。DNase I的活性依賴鈣離子，能夠被鎂離子和二價錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；二價錳離子存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。
主要用途：製備不含DNA的RNA樣品；RT-PCR反應前RNA樣品中基因組DNA殘留去除；體外T7，T3，SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉錄後體系中DNA模板去除； nick translationin; 產生DNA隨機片段； 細胞凋亡Tunel檢測中部分剪切基因組DNA作為實驗陽性對照等。
特點：特異性降解DNA，不能降解RNA。
來源：攜帶Bovine Pancreatic DNase I基因的畢赤酵母菌株重組表達。
酶活性定義：在37℃孵育10分鐘將1 µg的pBR322載體DNA全部降解所需酶量定義為一個酶活單位。
失活或抑制：75℃加熱10 min可使DNase I充分失活。
純度：SDS-PAGE檢測純度≥95%，無RNase；10 U/μL。
酶儲存緩沖液：25 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl2, 50% glycerol, pH7.6。
10×Reaction Buffer：100 mM Tris-HCl, 25 mM MgCl2, 5 mM CaCl2, pH7.6。
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Component |
G3342-500U |
G3342-10KU |
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Recombinant DNase I (RNase-free) |
50 μL |
1 mL |
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10×DNase I Reaction Buffer |
1 mL |
11×1 mL |
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25 mM EDTA |
250 μL |
6×1 mL |
實驗步驟
1、RNA樣品中去除DNA殘留參考反應體系：
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RNA |
1 μg |
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Recombinant DNase I |
1 U |
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10×DNase I Reaction Buffer |
1 μL |
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RNase-free Water |
to 10 μL |
2、按上述配方配置好之後，輕輕混勻，隨後將液體離心至管底。
3、37℃孵育30 min，反應完後在反應體系中加入0.5 μL 25 mM EDTA終止反應。
4、75℃孵育10 min使DNase I完全失活。
注意事項
1，在使用該產品時應將酶存放在冰盒內或冰浴上，使用完畢後該立即於-20ºC保存。
2，為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。
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