產品介紹
- DNA萃取與純化
- RNA萃取與純化
- 蛋白質萃取與純化
- Exosomes 外泌體相關試劑
- PCR商品
- RT-PCR
- Wastern Blot
- Antibotic
- Cloning 相關商品
- 細菌培養
- BioTnA-化學染色試劑
- BioTnA-免疫染色試劑
-
Thermo Scientific™
- Environmental Sampling Vials and Closures (Critical environment products)
- 2D Bardcode 存儲管系列
- Nunc / Abgene™ 96孔盤/深孔盤/封膜機
- GA 標籤
- Nalgene Bottle
- Nalgene 三角錐瓶-Erlenmeyer Flasks
- 冷凍儲存系列產品
- Nalgene 離心管/離心瓶
- ELISA 酵素免疫分析盤
- Nunc™ 無菌刻度吸管_尖底離心管
- IVF 體外受孕系列產品
- Nalgene™ 過濾杯/過濾杯組
-
細胞培養 Cell Culture
- Nunc™ EasYFlask™ Flasks_細胞培養瓶
- Nunc™ EasYDish_細胞培養皿
- Nunc™ Assays Dishes / Multidishes_細胞培養多孔盤
- Nunc™ T300 Flask_細胞培養瓶
- Nunc™ TripleFlask_細胞培養瓶
- Nunc™ Lab-Tek / Lab-Tek II Chamber Slide_細胞培養玻片
- Nunclon™ Sphera 懸浮細胞培養瓶
- Nunc™ UpCell™ Surface
- Nunc™ Square BioAssay Dishes_方形細胞培養皿
- Nunc™ Cell Factory™ Systems_細胞工廠
- Cell Culture Inserts
- Nalgene 洗滌瓶_Wash Bottle
- Nalgene Jars 廣口罐/梅森瓶
- Nalgene Carboy
- Detergent/Reagent
- Nalgene 吸水墊/Tubing/其他產品
- 基礎理化儀器
- ServiceBio 儀器總覽
- ServiceBio 耗材總覽
- Servicebio 試劑總覽
- Servicebio 生物科技工業原料/酶
- 禾聯家電
- 會員點數兌換專區
- Labobanker 細胞凍液
1 /
1
Servicebio Benzonase Nuclease 全能核酸酶
商品編號:G3461-50KU
- 折扣價:NT$
- 售價:NT$
- 定價:NT$
- 使用紅利點數:點
產品庫存:0
本公司生產的全能核酸酶(Benzonase Nuclease),又稱廣譜核酸酶,是一種來源於粘質沙雷氏菌(Serratia Marcescen)的非特異性核酸內切酶。該內切酶可以在非常寬泛的條件下攻擊並降解所有形式的DNA和RNA(單鏈、雙鏈、線性、環化),在核酸鏈內任意位置進行切割,將核酸完全降解為3-5個堿基長度的5’-單磷酸寡核苷酸。工作pH範圍為pH6-10,最適pH為8.0,工作溫度範圍為0-42℃,最適溫度為37℃。全能核酸酶用途廣泛,常用於重組蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸,可以有效降低細胞、組織、微生物等蛋白裂解液的粘度等。本產品沒有His-tag。
酶活性定義:在37℃、pH 8.0反應條件下,2.625 mL反應體系中,在30 min內使△A260吸收值變化1.0(相當於完全消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所需酶量定義為一個酶活單位。
純度:SDS-PAGE檢測純度≥95%,無蛋白酶,≥250 U/μL。
酶儲存緩沖液:20 mM Tris-HCl,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50% Glycerol,pH 8.0。
稀釋緩沖液:20 mM Tris-HCl,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,pH 8.0。
圖1. 全能核酸酶使用效果圖。A,293細胞經RIPA裂解液裂解後,未加入全能核酸酶的樣品基因組DNA大量釋放呈粘稠狀,而加入了全能核酸酶的樣品由於釋放的基因組DNA被降解不粘稠;B,在1 g大腸桿菌濕菌中加入5 mL RIPA裂解液混勻後,分別加入相應量的全能核酸酶(0、80、300 U/mL),室溫處理30 min後拍照觀察;C,分別取40 μg鮭魚精DNA,加入相應量的全能核酸酶,於37℃孵育30 min後瓊脂糖凝膠檢測。
實驗步驟
1. 用於降低細胞、組織或細菌裂解液的黏度:
細胞樣本: a,貼壁細胞樣本移除培養基後,再用PBS清洗。每1 mL RIPA裂解液(建議G2033、G2002)中加入1-2 μL全能核酸酶,然後依照裂解液的使用說明用於貼壁細胞的裂解。室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心後取上清即可進行後續實驗。 b,懸浮細胞樣本離心收集後,去上清。每1 mL RIPA裂解液(建議G2033、G2002)中加入1-2 μL全能核酸酶,然後依照裂解液的使用說明用於懸浮細胞的裂解。室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心後取上清即可進行後續實驗。
組織樣本:組織塊用預冷PBS清洗去除血污,剪成細小的碎塊。以每50 mg組織加入1 mL裂解液(建議G2033、G2002)的比例添加,同時加入1-2 μL全能核酸酶。用研磨儀(推薦SWE-C6、SWE-FP)將組織進行研磨,直到充分裂解。組織充分裂解後,室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心後取清即可進行後續實驗。
細菌、真菌樣本:細菌或真菌離心收集後,每1 mL裂解液(建議G2033、G2002)中加入1-2 μL全能核酸酶,然後依照裂解液的使用說明用於細菌或真菌的裂解。室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心後取上清即可進行後續實驗。
註:常用的裂解液中含有不同濃度的Triton X-100或NP-40、SDS及脫氧膽酸鈉等,這些試劑對全能核酸酶有一定的影響,所以對於不同實驗需要適當增加酵素量或延長孵育時間。
2. 用於去除重組蛋白中的核酸:建議反應體系中全能核酸酶的終濃度為90 U/mL,可降解體系中所有核酸。
3. 用於提高包涵體蛋白複性率:推薦細胞裂解液中全能核酸酶的酵素濃度為1 U/mL,可有效降低因基因組DNA而黏附的蛋白酶,提高包涵體純度,最終提高包涵體蛋白的複性速率。
注意事項
1. Mg 2+是全能核酸酶的關鍵催化輔因子,反應緩衝液含有1-2 mM mg 2+對全能核酸酶的活性是必須的。
2. 全能核酸酶建議使用條件請參考下表。
3. 為了您的安全和健康,請穿著實驗服並戴上一次性手套操作。
Condition | Optimal Range | Effective Range |
Mg 2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8.0-9.2 | 6.0-10.0 |
Temperature | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >100 mM |
2-Mercaptoethanol | 0-100 mM | >100 mM |
Na +、K +、NH 4 + | 0-20 mM | 0-150 mM |
PO 4 3- | 0-10 mM | 0-100 mM |
Triton X-100 | - | <0.4% |
Sodium deoxycholate | - | <0.4% |
SDS | - | <0.05% |
Urea | - | <5 M |
(NH 4 ) 2 SO 4 | - | <100 mM |
產品庫存:0
- 折扣價:NT$
- 售價:NT$
- 定價:NT$