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Servicebio Exosome Concentration Solution
商品編號:G4114-250ML
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外泌體是由細胞主動分泌到胞外的大小均一、粒徑在30-150 nm的一種納米級膜性囊泡。該囊泡具有自身特異性標志物,內部包裹了蛋白質、mRNA、miRNA、脂質等物質,可通過細胞之間物質和信號通訊,參與細胞生長、增殖、分化、遷移,以及血管新生和腫瘤生長等過程。Servicebio Exosome Concentration Solution是一種常見的外泌體濃縮液,可以快速從細胞上清、動物血清等液體生物樣本中獲取大量完整的外泌體顆粒。
Component |
G4112-250ML |
Exosome Concentration Solution |
250 mL |
Product Manual |
1 pc |
實驗步驟
1. 樣品預處理:
1.1 低含量外泌體類生物樣本(以“細胞上清液”為例):取細胞上清液,4℃,3000×g 離心10 min去除細胞團塊;取上清液,4 ℃,10,000×g 繼續離心 20 min,取上清液,使用0.22 μm的濾膜過濾,初步純化備用。
1.2 高含量外泌體類生物樣本(以“動物血清液”為例):取動物血清液,4℃,3000×g 離心 10 min;取離心上清,4℃,10,000×g離心 20 min,取離心上清使用0.22 μm的濾膜過濾,初步純化後,按動物血清體積:1×PBS體積=1:9的比例稀釋動物血清備用。
2. 外泌體濃縮:
2.1 取處理後的生物樣本,與外泌體濃縮液等體積混合,劇烈Vortex 15 s-60 s後,4℃冰箱靜置2h;(可選:靜置期間每30 min渦旋振蕩一次;)
2.2 將混合液置於離心機中,4℃、10000×g離心60 min;去除上清液。
2.3 按外泌體濃縮液體積:1×PBS 體積=100:1的比例,加入預冷PBS緩沖液,充分重懸離心沈澱(注意:此時相當於濃縮100倍,可根據需求加入不同體積的PBS重新懸浮)。
2.4 將懸浮液轉移至1.5 mL離心管中,置於離心機中,4℃、12000 rpm離心5 min;收集上清液。
2.5 該上清液富含外泌體,可以應用於後續實驗,也可以分裝並-80℃凍存備用。
注意事項
1. 本產品可以長期常溫穩定保存,使用前請搖晃混勻。
2. 本品可作為G4113外泌體分離層析柱(細胞上清液)中細胞上清濃縮劑的補充劑。
3. 實驗過程中請穿實驗服並戴一次性手套,避免汙染,確保安全。
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