1 /
1
Servciebio Chromatographic Column for Separating Exosomes (Serum/Plasma)
商品編號：G4112-5
外泌體天然存在於血液、唾液、尿液和母乳等體液中，是由細胞主動分泌到胞外的大小均一、粒徑在30-150 nm的一種納米級膜性囊泡。該囊泡具有自身特異性標志物，內部包裹了蛋白質、mRNA、miRNA、脂質等物質，可通過細胞之間物質和信號通訊，參與細胞生長、增殖、分化、遷移，以及血管新生和腫瘤生長等過程。
本產品是一種尺寸排阻色譜柱（SEC），適用於血清/血漿外泌體的快速分離和純化，既可以保留高純度和高天然活性的外泌體，又可以高效去除蛋白質；有效地避免了傳統超速離心方法中超高離心力造成的外泌體膜結構損傷，同時減少了傳統沈澱法中高濃度蛋白等對外泌體純度的影響。
|
Component |
G4112-5 |
|
Chromatographic Column for Separating Exosomes (Serum/Plasma) |
5 pieces |
|
Product Manual |
1 pc |
實驗步驟
1 準備工作：
1.1 自備常溫、無菌的緩沖液，如PBS（推薦G4202）；
1.2 自備常溫、無菌的0.1 M NaOH、20% 乙醇；
1.3 使用分離柱前，取下分離柱紅色上蓋，將分離柱置於支架（推薦G6063）待用；
2 外泌體分離：
2.1 將血清/血漿類生物樣本使用0.22 μm的濾膜過濾，初步純化備用；
2.2 取下分離柱白色底蓋，待柱內保護液流出後，分批加入共30 mL的緩沖液清洗分離柱；
2.3 待篩板上方緩沖液全部進入分離柱後；取0.5 mL步驟2.1中備用血清/血漿加在篩板中央，（不足0.5 mL加入緩沖液補至0.5 mL）；
2.4 待全部血清/血漿經過篩板進入分離柱後，加入2.5 mL緩沖液；
2.5 待上一步緩沖液全部經過篩板進入分離柱後，加入1 mL緩沖液，與此同時收集1 mL的洗出液，該液中富含天然活性的外泌體，可以應用於後續實驗，也可以-80℃凍存備用。
3 分離後處理：
3.1 完成外泌體分離後，分批加入共30 mL緩沖液清洗分離柱；
3.2 如果需要繼續使用分離柱分離血清/血漿外泌體，重覆操作步驟2.3-2.5即可；
3.3 如果不需要繼續使用分離柱分離血清/血漿外泌體，先加入5 mL 0.1 M NaOH清洗分離柱，再分批加入共20 mL緩沖液清洗和平衡分離柱，然後加入5 mL 20% 乙醇清洗分離柱，清洗完畢時蓋上分離柱白色底蓋；最後加入2 mL 20% 乙醇保濕，蓋上並塞緊分離柱紅色上蓋，分離柱常溫保存。
注意事項
1. 本產品分離不同血清/血漿的外泌體時，洗脫曲線和純度略有不同，但不影響大體趨勢。
2. 樣本量大或樣本中外泌體含量低時，可以先濃縮樣本再使用分離層析柱分離外泌體。
3. 本產品分離血清/血漿外泌體過程中應避免分離柱中液體長時間斷流。
4. 本產品使用過程中，同一根柱子請勿分離不同來源的生物樣本，同一根柱子請勿重覆使用超過5次。
5. 本產品適宜常溫保存和使用，應避免低溫使用和高溫加熱。
6. 實驗過程中請穿實驗服並戴一次性手套，避免汙染，確保安全。
產品庫存：0
