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Servicebio 免疫電子顯微鏡專用固定液
商品編號:G1124-100ML
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透射電鏡可以觀察組織細胞的超微結構,免疫組織化學技術是用標記的特異性抗體(或抗原)對組織內抗原(抗體)的分布進行檢測後用普通光鏡觀察。免疫電鏡技術則是電鏡技術與免疫化學技術結合的產物,根據抗原抗體的高度特異性結合原理,用高電子密度的標記物(如金、鐵蛋白等)從超微結構水平檢測某些抗原性物質的定位,換句話說,免疫電鏡是在透射電鏡下觀察超微結構水平的免疫組織化學檢測結果,是免疫光鏡的延伸。免疫電鏡中最重要的問題之一是固定液的選擇,要求既要保持組織成分的抗原性,又要較好保存細胞的超微結構。
本產品免疫電鏡專用固定液,是專門用於免疫電鏡前期組織樣本的固定液,能較好保存組織超微結構及抗原。產品主要有效成分為甲醛和戊二醛。
使用說明
對於組織樣本,提前將免疫電鏡專用固定液裝在培養皿內。取材時快速用鋒利刀片準確切取目的組織,立即浸沒於固定液內。用手術刀在固定液中繼續切割成1 mm3大小。再將切割好的小組織塊轉移至裝有新鮮固定液的EP管內室溫避光固定2h,之後轉移到4℃避光保存及運輸。對於貼壁細胞:培養好的細胞棄去培養基,待固定液恢覆室溫後,加入免疫電鏡專用固定液室溫避光固定5 min左右。用細胞刮小心刮取細胞,低速離心收集細胞沈澱,再加固定液浸沒細胞沈澱室溫固定30min,然後轉移到4℃避光保存和運輸。如果對於細胞形態沒有要求,可將培養好的細胞用胰酶消化成細胞懸液後按照懸浮細胞固定步驟進行。
對於懸浮細胞:培養好的細胞經低速離心,棄去培養基。加入恢覆室溫的免疫電鏡專用固定液室溫避光固定30 min,轉4℃避光保存和運輸。
注意事項
1. 免疫電鏡檢測,前期樣本取材很關鍵,要求手法嫻熟,取材迅速,3 min內完成目標位置的取材及固定。取材時盡量減少對組織的牽拉、挫傷、擠壓等機械損傷。組織取材體積盡量小,不要超過1 mm3。如果組織塊太大,組織內部不能得到及時充分的固定,可能會影響超微結構。
2. 固定的樣本需要4℃保存和運輸,過程中避免溫度過低導致固定液結晶。
3. 請在通風良好的環境下使用,並做好防護。
4. 用完後請及時擰緊瓶蓋,防止有效成分揮發。
5. 操作時請穿實驗服,並佩戴一次性手套。
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